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石蜡切片机和冰冻切片怎么区分呢?

发表日期:2019-08-16 11:06:12   来源:本站   被阅读[]次
石蜡切片和冰冻切片是组织学中最常用的两种切片方式。顾名思义,本质上的不同就是将组织固化的方式不同:一种是用石蜡固化;另一种是用冰冻的方法(这个和羊肉卷的制作方式有些类似)。两者各有优缺点,在实验的应用上,石蜡切片常应用于IHC(免疫组化)实验,冰冻切片常应用于IF(免疫荧光)实验。他们相同的是应用的免疫学基本原理,即抗原与抗体特异性结合的原理。

石蜡切片机

下面详细介绍两种方法的异同点:

一、石蜡切片

石蜡切片技术是常规制片里面应用最广泛的方法。一般组织从取材固定再到制片成标本需要数天的时间,但是标本是可以长期保存的,属于一种永久性显微玻片技术。

固定:将新鲜组织切成小块,固定于4%多聚甲醛过夜。

脱水:为了减少组织材料的急剧收缩,应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行经70%、85%、95%直至纯酒精(无水乙醇),每次时间为1小时。

透明:常用的透明剂有二甲苯,二甲苯是石蜡的溶剂。此步最好在通风厨进行。

浸蜡:先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1小时。

先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍1小时左右。

包埋:以少许热蜡液将其底部迅速贴附于包埋盒内上,然后置于速冻台,让石蜡固定。

切片:切片刀的锐利与否、蜡块硬度是否适当都直接影响切片质量,可将蜡块至于冷水中改变蜡块硬度。通常切片厚度为5微米,用毛笔轻托轻放在37度水浴中展片。

贴片与烤片:

将水浴中展片捞至玻片上铺正,然后将载玻片放入37℃温箱中干燥。

二.冰冻切片

相比于石蜡切片-冰冻切片优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。

冷冻切片机

冰冻切片相比较于石蜡切片简单易行,一般进行固定脱水后,固定于包埋剂就可以在冰冻切片机进行切片。有些新鲜标本可以直接取材后,冷冻托涂包埋剂后置于冷冻托上速冻,冻好后立即切片。

冰冻切片最重要的是防止样品中冰晶的出现,一般可以通过速冻的方法使组织温度骤降,减少样品内冰晶的形成。也可以将组织置于20%~30%蔗糖溶液1~3天,利用高渗吸收组织中水分,减少组织含水量。

关于切片技术,你还有什么想说的,欢迎前来分享哟!


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